NPM1 A型突变体对TGF-β1诱导K562细胞增殖及AKT磷酸化的影响*

Effect of NPM1 mutant A on TGF-β1-induced K562 cell proliferation and AKT phos-phorylation

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摘要目的:观察核仁磷酸蛋白(nucleophosmin 1,NPM1)A型突变体过表达对TGF-β1诱导的K562细胞增殖及AKT磷酸化的影响.方法:腺病毒载体(Ad5－NPM1)转染髓系白血病K562细胞建立过表达NPM1蛋白细胞株;应用Western blot法及ELISA法分别检测细胞NPM1蛋白表达及上清液含量,Western blot法检测K562细胞NPM1、AKT和P-AKT蛋白表达,MTT法检测细胞增殖.结果:K562细胞NPM1蛋白表达水平呈Ad5-NPM1转染复数[(multiplicity of infection,MOI):30-200]依赖性增加,与空载组(Ad5-vector-100)相比,Ad5-NPM1-30、Ad5-NPM1-100组K562细胞及细胞上清液NPM1蛋白水平均显著增高(P<0.01).TGF-β1(10 ng/mL)能够诱导K562细胞AKT蛋白磷酸化,但对总AKT水平无明显影响.TGF-β1(10 ng/mL)+Ad5-NPM1-100组K562细胞P-AKT水平显著高于TGF-β1处理组(P<0.05),各组总AKT水平无显著差别(P>0.05).与空白对照组(CT)相比,TGF-β1(10 ng/mL)处理可促进K562细胞增殖;但TGF-β1(10 ng/mL)+Ad5-NPM1-100组细胞的增殖水平明显高于TGF-β1处理组(P<0.01).结论:NPM1可促进TGF-β1诱导的K562细胞增殖.NPM1促进TGF-β1诱导的K562细胞可能与AKT磷酸化有关.