换一批Hsa-miR-132通过靶向FOXA1基因影响食管癌细胞的增殖和侵袭
Hsa-miR-132 affects proliferation and invasion of esophageal carcinoma cells by targeting FOXA1 gene
摘要目的:探讨hsa-miR-132 (miR-132)对人食管癌细胞增殖和侵袭的影响及其可能的机制.方法:构建pCDNA3.1(+ )-miR-132表达载体并转染高转移潜能的人食管癌细胞KYSE 150,G418筛选稳定过表达miR-132的KYSE150细胞.软琼脂克隆形成实验和Transwell小室实验检测KYSE150细胞的增殖和侵袭,Real-time PCR和Western blotting检测miR-132和叉头框蛋白A1基因(forkhead box protens A1,FOXAI)在KYSE150细胞中的表达,双荧光素酶报告基因分析和Western blotting检测过表达miR-132对FOXA1的调控作用.结果:成功构建pCDNA3.1(+)-miR-132质粒,获得稳定过表达miR-132的KYSE150细胞.亲本KYSE150细胞中miR-132低表达,而FOXA1蛋白高表达.与转染空载体和未转染KYSE150细胞相比,转染pCDNA3.1(+)-miR-132不影响KYSE150细胞的增殖(13.9 +0.33vs 15.4±0.11、17.1±0.20,P＞0.05),但细胞体积较小且表面比较光滑;其可显著降低KYSE150细胞的侵袭能力[(55±1.6)vs(129.0±3.1)、(124.0±2.8)个细胞,P＜0.01].miR-132能够作用于FOXA1 3'-UTR,从而抑制内源性FOXAI的表达.结论:食管癌KYSE150细胞低表达miR-132,外源性过表达miR-132可负向调控FOXA1的表达,从而抑制KYSE150细胞的侵袭能力.
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栏目名称
DOI
10.3872/j.issn.1007-385X.2011.05.004
发布时间
2011-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
河北省卫生厅重点项目（20110068）
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