换一批K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果
Effects of target cell overexpression of IL-15, 4-1BBL and IL-18 combine with IL-2 on NK cell activation and cytotoxicity during ex vivo expansion
摘要目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果.方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果.结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)％;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60％、40％、20％、40％和63％,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19％、29％、26％和28％,其ADCC活性从(33±5.6)％上升至(65 ±12)％;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)％提高至(96±2)％.对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)％,其对K562细胞的杀伤活性提高了17％左右.结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要.
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关键词
自然杀伤细胞细胞毒活性抗体依赖性细胞介导的细胞毒活性体外扩增活化性受体抑制性受体natural killer cell (NK cell) cytotoxicity antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) ex vivo expansion activation receptor inhibitive receptors
栏目名称
DOI
10.3872/j.issn.1007-385X.2014.05.010
发布时间
2014-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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