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ATG-F培养体系制备CIK细胞的表型特点及其对K562细胞的杀伤作用

Phenotypes of CIK cells prepared by ATG-F culture system and its killing effect against K562 cells

摘要目的:探讨抗人T细胞兔免疫球蛋白-费森尤斯(anti-humanT lymphocyte rabbit immunoglobulin-Fresenius,ATG-F)和IFN-γ、IL-2组成的培养体系诱导细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞的性能并用于临床细胞治疗的可行性.方法:采集分离健康供者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),依照激活抗体的不同分组分别培养CIK细胞,在第7和14天计数总细胞数量.流式细胞术检测ATG-F组、CD3组和TG(抗人胸腺细胞兔免疫球蛋白,Thymoglobulin)组CIK细胞组成及细胞表面活化性、抑制性受体分子的比例,还检测第14天时ATG-F高剂量组、CD3组和TG组CIK细胞对K562靶细胞的杀伤性能.结果:使用ATG-F、IFN-γ、IL-2培养体系成功诱导出CIK细胞.第14天时高剂量ATG-F(F-H)组增殖倍数明显高于TG组(27.25±1.25 vs 16.60±1.72,P<0.01);其CD3+CD56+细胞比例与CD3组无统计学差异(P<0.05),但CD3CD56+的NK细胞显著高于TG组及CD3组[(11.19±2.60)% vs(5.66±1.00)%、(1.42±0.51),P<0.01]、CD4+T细胞比例显著低于CD3、TG组[(4.35±1.47)%vs(26.88±5.01)%、(14.52±6.22)%,P<0.01]、CD56+CD94+、CD56+CD158a+、CD56+CD158b细胞比例均明显高于CD3组(均P<0.01);F-H组在靶效比为1∶10时对K562的杀伤效力显著高于CD3组[(60.52±2.05)% vs (30.02±6.67)%,P<0.01].结论:ATG-F培养体系制备的CIK细胞比常规培养体系所得CIK细胞具有更高的NK细胞比例,其活化受体对K562细胞更强的细胞毒性.

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