单克隆抗体18H12抑制PAMC-82胃癌干细胞的自我更新和侵袭能力

Monoclonal antibody 18H12 suppresses the self-renewal and invasion of PAMC-82 gastric cancer stem cells

摘要目的:探讨靶向胃癌干细胞的功能性单克隆抗体18H12对胃癌干细胞自我更新和侵袭能力的作用.方法:以胃癌细胞株PAMC-82为模型,用流式细胞术检测其亲本细胞和通过成球培养富集干细胞后细胞膜表面烯醇化酶1(enolase-1,ENO1)的表达水平,用流式细胞术分选出ENO1+和ENO1-细胞,并检测其自我更新和侵袭能力.以商业化的ENO1抗原和抗体作为样品,利用免疫共沉淀实验(co-immunoprecipitation,CoIP)验证靶向ENO1的18H12抗体能够准确识别ENO1.分别用18H12处理PAMC-82细胞12、24、48 h后,用甲基纤维素成球实验和Transwell小室法分别检测18H12对PAMC-82细胞自我更新和侵袭能力的影响.结果:细胞膜表面的ENO1在PAMC-82球体细胞中的表达水平明显高于亲本细胞(P＜0.01),ENO1可作为一个靶向胃癌干细胞的潜在靶点.分选的ENO1+细胞的自我更新和侵袭能力明显强于ENO1细胞和亲本细胞(P＜0.05或P＜0.01).18H12抗体能够准确识别ENO1,与商业化抗体识别的条带一致.单抗18H12能显著抑制PAMC-82细胞的自我更新和侵袭能力(均P＜0.01).结论:单克隆抗体18H12能够显著抑制胃癌干细胞的自我更新和侵袭能力,有望成为靶向胃癌干细胞的候选抗体药物.