泛素特异性蛋白酶21对胆管癌细胞增殖及迁移的影响及机制

Effect and mechanism of ubiquitin-specific protease 21 on proliferation and migration of cholangiocarcinoma cells

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摘要目的:探究泛素特异性蛋白酶21(USP21)在胆管癌(CCA)中的表达及其对CCA细胞增殖与迁移的作用及其机制.方法:通过生物信息学方法和免疫组化及WB法检测CCA组织及细胞中USP21的表达情况.利用体外克隆形成、EdU及Transwell实验检测敲低USP21对CCA细胞QBC939和RBE增殖及迁移的影响.通过RNA测序、质谱、免疫共沉淀(Co-IP)及WB法探究USP21的促癌机制.结果:TCGA等数据库分析结果显示,USP21 mRNA在CCA组织中呈高表达(均P<0.05).USP21蛋白在CCA组织和细胞中呈高表达(P<0.05或P<0.001或P<0.000 1).敲低USP21后,QBC939和RBE细胞的增殖和迁移能力均显著降低(P<0.01或P<0.001).RNA测序结果表明,敲低USP21可以通过抑制PI3K/AKT信号通路抑制CCA细胞的增殖和迁移能力(P<0.05).质谱鉴定发现,USP21与胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)相结合.Co-IP和WB实验结果表明,USP21与IGF2BP1结合并通过泛素化途径调控IGF2BP1的蛋白表达(P<0.001或P<0.000 1).结论:USP21在CCA组织和细胞中均呈高表达,其通过IGF2BP1/PI3K/AKT信号通路增强CCA细胞的增殖及迁移能力.