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国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备CAR-T细胞的性能对比

Performance comparison of domestic and imported CD3/CD28 activation beads for CAR-T cell manufacturing

摘要目的:比较国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备的CAR-T细胞的性能差异,为国内CAR-T细胞研发和生产提供备用或替代方案.方法:以进口CD3/CD28激活磁珠︰CD3+T细胞比例为1∶1的成熟方案作为研究对照,国产磁珠设置1∶2、1∶1和2∶1的比例梯度激活T细胞,T细胞激活72 h后使用CAR慢病毒感染制备CAR-T细胞.分别在慢病毒感染后的第2、4、7天计数,监测CAR-T细胞增殖情况;感染5 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞阳性率;感染8 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞的CD4/CD8分型情况和PD1+TIM3+耗竭细胞比例.结果:国产CD3/CD28激活磁珠与进口磁珠制备的CAR-T细胞CD4/CD8分型相似,CAR-T细胞阳性率略低于进口磁珠(53.7%vs 57.9%),但CAR-T细胞扩增较进口磁珠增加1倍左右,耗竭水平仅为进口磁珠的一半(4.21%vs 7.91%).此外,国产磁珠的使用量低于进口磁珠,有利于降低CAR-T细胞研发和生产成本.结论:国产CD3/CD28激活磁珠用于制备CAR-T细胞总体性能不劣于进口磁珠,有潜力作为进口磁珠的备用或替代方案.

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