环磷腺苷效应元件结合蛋白对前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭和细胞周期的影响
Effects of CREB on migration,invasion,and cell cycle of prostate cancer PC3 cells
摘要目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响.方法:常规培养前列腺癌细胞PC3,用转染试剂将过表达对照质粒,CREB过表达质粒(CREB-oe)、敲减对照序列(si-NC)和si-CREB序列转染至PC3细胞,分为vector,CREB-oe、si-NC和si-CREB组.用划痕愈合实验、Transwell小室实验和流式细胞术分别检测各组细胞的迁移、侵袭能力和细胞周期情况.用CRISPR/cas9技术构建CREB敲除的PC3细胞,用PC3细胞移植瘤实验检测CREB敲除对移植瘤生长的影响.结果:在PC3细胞中成功地敲减或过表达了CREB(均P<0.01),过表达或敲减CREB均可明显促进或抑制PC3细胞的迁移、侵袭能力(均P<0.01),过表达CREB可促使PC3细胞进入S期,而敲减CREB表达则使PC3细胞阻滞于G1期(均P<0.01).成功地构建了CREB敲除PC3细胞,敲除CREB可明显抑制PC3细胞移植瘤的生长(P<0.01).结论:敲减或敲除CREB能够抑制PC3细胞的迁移和侵袭,并使其阻滞于G1期,进而抑制移植瘤的生长.
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