摘要目的:探讨钙蛋白酶小亚基1(CAPN4)调控肺腺癌顺铂耐药性及肿瘤干细胞干性的作用机制,为通过靶向干性逆转耐药提供实验依据.方法:收集2023年1月至2024年1月期间在福建省肿瘤医院手术切除的10例肺腺癌患者的组织标本,通过免疫组织化学(IHC)法检测5例对顺铂耐药与5例敏感肺腺癌组织中CAPN4的表达差异,并进行组织化学评分(H评分).利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因表达谱交互分析(GEPIA)平台进行肺癌CAPN4基因表达相关的生存分析.另收集2例对顺铂耐药、2例敏感的肺腺癌组织标本,建立肺腺癌类器官(PDO)模型,采用H-E、IHC染色评估PDO与原发肿瘤形态学的一致性.采用慢病毒介导的shRNA技术敲减CAPN4基因表达,运用qPCR和WB法检测PDO中干细胞标志物ALDH1A1、CD133、Nanog和SOX9的基因和蛋白表达水平.通过腺苷三磷酸(ATP)法检测CAPN4下调后肺腺癌PDO对顺铂的敏感性变化,使用半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性检测法评估CAPN4下调的肺腺癌PDO经顺铂处理后的凋亡情况.结果:IHC检测结果表明,耐药肺腺癌患者组织中CAPN4蛋白的表达水平显著上调(P<0.05).在TCGA数据库肺腺癌患者队列中,CAPN4的高表达与肺腺癌患者的不良预后(OS缩短)显著相关(HR=1.4,P<0.05).耐药患者来源的PDO中CAPN4蛋白表达、干细胞标志物的基因和蛋白表达水平均显著上调(均P<0.05).在顺铂敏感性测试中,耐药患者来源PDO的IC50 值显著高于敏感患者来源的PDO(P<0.05).敲低CAPN4后,耐药患者来源的PDO的干细胞标志物表达显著降低,顺铂敏感性增强(P<0.05).结论:敲低CAPN4可降低肺腺癌PDO的干细胞标志物表达,显著增强其对顺铂的敏感性,为逆转肺癌顺铂耐药提供了潜在治疗靶点.