LINC00894调节miR-205-5p/GPNMB轴对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
Effects of LINC00894 regulating miR-205-5p/GPNMB axis on proliferation,migration,and invasion of gastric cancer cells
摘要目的:探究长链非编码RNA00894(LINC00894)调节微小RNA-205-5p(miR-205-5p)/糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B(GPNMB)轴对胃癌细胞恶性生物学行为的影响.方法:收集2022年11月至2023年9月在河北医科大学第一医院手术切除的25例胃癌组织及相应癌旁组织,常规培养BGC823细胞,随机将其分为对照组、sh-NC组、sh-LINC00894组、sh-LINC00894+anti-NC组、sh-LINC00894+anti-miR-205-5p组,用转染试剂将相应质粒转染至各组细胞中.qPCR法检测各组BGC823细胞和癌组织中LINC00894、miR-205-5p和GPNMB mRNA表达,双萤光素酶报告基因实验和AGO2-RNA免疫共沉淀验证LINC00894与miR-205-5P和miR-205-5p与GPNMB间的靶向结合关系.克隆形成实验、EdU染色、划痕愈合实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力.WB法检测各组细胞中CDK1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达.裸鼠移植瘤实验检测敲减LINC00894对移植瘤生长的影响,免疫组化法检测移植瘤组织中GPNMB蛋白的表达.结果:胃癌组织和细胞中LINC00894、GPNMB呈高表达,miR-205-5p呈低表达(均P<0.05).LINC00894与miR-205-5p和miR-205-5p与GPNMB之间存在靶向结合负向调控关系(均P<0.05).敲减LINC00894可促进BGC823细胞中miR-205-5p表达并抑制GPNMB表达(均P<0.05),敲减LINC00894可抑制BGC823细胞的增殖、迁移和侵袭能力,以及抑制CDK1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达(均P<0.05),抑制miR-205-5p则可逆转此作用(均P<0.05).敲减LINC00894可抑制BGC823细胞移植瘤的生长、促进miR-205-5p表达、抑制GPNMB蛋白表达(均P<0.05).结论:在胃癌组织及细胞中LINC00894呈高表达,miR-205-5p呈低表达,敲减LINC00894表达可调控BGC823细胞中miR-205-5p/GPNMB通路蛋白表达并抑制其恶性生物学行为.
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