lncRNA PTENP1通过调控SCARA5表达对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及其可能的机制
Effects and mechanisms of lncRNA PTENP1 on proliferation,apoptosis,migration,and invasion of bladder cancer cells by regulating SCARA5 expression
摘要目的:探究骨髓间充质干细胞(BMSC)衍生的外泌体lncRNA PTENP1在膀胱癌进展中的功能机制.方法:采用透射电子显微镜、纳米颗粒追踪分析及WB法检测外泌体标志蛋白的方式鉴定BMSC来源的外泌体(BMSC-Exo).通过共聚焦显微镜检测 BMSC-Exo被膀胱癌5637细胞内化的过程.按转染物不同,将膀胱癌5637和T24细胞随机分为以下组别:对照组、BMSC-Exo组、BMSC OE-NC-Exo组、BMSC OE-PTENP1-Exo组、BMSC sh-NC-Exo组和BMSC sh-PTENP1-Exo组.采用CCK-8、集落形成实验评估细胞增殖水平,流式细胞术评估细胞凋亡水平,划痕愈合和Transwell实验评估细胞迁移和侵袭能力.通过RNA下拉(Pull down)、RNA免疫沉淀(RIP)技术验证miR-17和PTENP1、A类清道夫受体5型(SCARA5)mRNA之间的靶向结合关系.结果:qRT-PCR显示过表达PTENP1的BMSC外泌体(BMSC OE-PTENP1-Exo)显著提升膀胱癌细胞中PTENP1水平(P<0.01).BMSC OE-PTENP1-Exo抑制细胞增殖(P<0.01)、迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01).此外,体内实验显示BMSC OE-PTENP1-Exo显著抑制裸鼠移植瘤生长(P<0.01).结论:BMS-Exo可通过递送PTENP1作为miR-17的"分子海绵",解除miR-17对SCARA5的抑制作用,进而上调SCARA5的表达,抑制膀胱癌细胞的恶性生物学行为.
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