摘要目的:探讨构建靶向CD7抗原的嵌合共刺激受体(CCR)并制备该受体修饰的健康供者来源γδ T细胞,以评估其对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的体内与体外杀伤作用.方法:构建携带CD7-DAP10-CCR的慢病毒载体,并转导健康人外周血γδ T细胞,制备靶向CD7抗原的CCR γδ T细胞(CD7-DAP10-CCR-γδ T),所获细胞借助表达CD64、CD86和CD137L的人工抗原提呈细胞(aAPC)进行体外扩增.采用Annexin Ⅴ/7-AAD方法检测CD7-DAP10-CCR-γδ T对T-ALL细胞(Jurkat)、CD7缺陷型Jurkat细胞(CD7? Jurkat)及异体健康人原代αβ T细胞的体外杀伤作用,共设置了3组效靶比(E∶T=1∶1、1∶3和1∶10),孵育时间为18～24 h.其中,Jurkat细胞作为CD7阳性靶细胞,CD7? Jurkat作为CD7阴性靶细胞以验证杀伤特异性,而异体健康人原代αβ T细胞则作为CD7阳性正常细胞对照,用于评估CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞的脱靶效应.此外,在T-ALL荷瘤免疫缺陷小鼠体内验证药效,通过定期对荷瘤免疫缺陷小鼠进行活体成像、体质量检测及生存期观察,评估CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞在荷瘤免疫缺陷小鼠体内的药效.结果:成功利用aAPC体外制备出CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞,其平均扩增倍数超过10 000倍.体外杀伤实验表明,该细胞对T-ALL细胞具有较高的杀伤能力(P<0.01),对Jurkat 细胞具有较高的毒性(P<0.01),对CD7? Jurkat细胞杀伤作用有限,而对高表达CD7的正常原代αβ T细胞基本无杀伤作用;荷瘤免疫缺陷小鼠体内药效试验结果显示,相对于对照PBS组,经CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞治疗后,荷瘤免疫缺陷小鼠的生存期显著延长(P<0.01).结论:体外借助aAPC能成功制备CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞,并且CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞在体外、小鼠体内均对T-ALL细胞具有较强的杀伤作用,表明CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞具备对T-ALL的治疗潜力.