摘要目的:通过多组学整合分析,解析肠道菌群在胆管癌(CCA)发生发展中的潜在作用机制并识别相关关键基因.方法:基于SRA数据库的16S rRNA测序数据,比较CCA患者与健康对照者的肠道菌群组成;采用孟德尔随机化(MR)分析评估菌群与CCA风险的遗传关联.通过gutMGene和GeneCards数据库获取相关代谢物与基因,进行代谢和功能富集分析.整合GEO单细胞转录组数据(GSE213452),解析肿瘤微环境的细胞组成,重点关注T细胞亚群及其功能状态,并结合TCGA-CHOL数据集验证关键候选基因的表达差异.结果:与健康对照组相比,CCA患者肠道菌群组成发生显著改变,变形菌门下菌群异常富集(LDA>4).MR分析进一步证实,肠杆菌目与肠杆菌科的遗传易感性均与CCA风险呈正向关联.代谢通路富集分析提示,菌群相关代谢物主要参与嘌呤代谢及糖酵解/糖异生等通路;功能富集分析显示,相关基因显著富集于NOD样受体、IL-17、Toll样受体及NF-κB信号通路等炎症免疫通路.单细胞转录组分析结果显示,CCA组织中肿瘤细胞比例显著升高(P<0.05),T细胞比例由20.7%增至39.2%;拟时序分析结果表明,MKI67? T细胞处于分化末期并呈高增殖特征,其差异基因与菌群相关基因存在交集,其中SERPINA1和IFNG表达在肿瘤免疫微环境中显著变化(P<0.001),可能发挥核心调控作用.TCGA-CHOL数据集验证显示,SERPINA1在CCA肿瘤组织中显著下调(P<0.001),而IFNG在肿瘤与正常组织间无显著差异(P>0.05).结论:肠道菌群失衡(尤其是肠杆菌科异常增殖)可能通过代谢-免疫调控网络促进CCA进展,T细胞功能变化与关键基因(SERPINA1和IFNG)在MKI67+T细胞中的差异化表达模式密切相关.