摘要目的 探讨血必净注射液对抗CD19嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)体外肿瘤杀伤活性的影响.方法 构建基于单链抗体(scFV)抗CD19靶点的CAR分子,将CAR基因装载于逆病毒载体质粒中,制备逆病毒载体,转导健康人供体T细胞制备抗CD19?CAR-T细胞.以CD19阳性淋巴瘤细胞(Raji)、Raji-荧光素酶(LUC)标记细胞为靶细胞,将未转导的T细胞、CD19?CAR-T细胞分别与靶细胞按1:2、1:4、1:8的效靶比共孵育12?h后,分别采用流式细胞术、荧光素酶报告基因检测法检测CAR-T细胞对靶细胞的杀伤效果.将血必净注射液按1?g/L及10?g/L浓度加入CD19?CAR-T细胞共培养基,采用同样的方法检测不同浓度血必净注射液处理的CD19?CAR-T细胞对肿瘤细胞的杀伤效率.结果 健康人群来源的CD19?CAR-T细胞经过14?d培养后扩增良好,每48?h扩增倍数为2～6倍,阳性率70.17％,提示CD19?CAR-T细胞制备成功.效靶比为1:2、1:4、1:8时,CD19?CAR-T细胞对Raji细胞和Raji-LUC细胞的杀伤效率均显著高于未转导T细胞〔效靶比1:2时Raji细胞(65.57±2.93)％比(13.17±0.69)％,Raji-LUC细胞(49.23±2.11)％比(14.04±2.68)％;效靶比1:4时Raji细胞(44.40±0.80)％比(10.06±2.44)％,Raji-LUC细胞(29.97±1.77)％比(8.60±0.71)％;效靶比1:8时Raji细胞(27.39±1.70)％比(9.05±1.13)％,Raji-LUC细胞(25.40±0.57)％比(7.09±0.44)％,均P<0.001〕.在相应效靶比条件下,经1?g/L和10?g/L血必净注射液处理的CD19?CAR-T细胞对Raji细胞和Raji-LUC细胞的杀伤效率均高于未经处理的CD19?CAR-T细胞,其中以经1?g/L血必净注射液处理的CD19?CAR-T细胞的杀伤效率升高最为显著〔效靶比1:2时Raji细胞(74.53±2.56)％比(71.91±3.25)％、(64.06±0.86)％,Raji-LUC细胞(57.67±0.58)％比(53.33±0.58)％、(49.00±2.00)％;效靶比1:4时Raji细胞(63.96±3.23)％ 比(50.84±5.54)％、(43.95±0.50)％,Raji-LUC细胞(43.33±0.58)％ 比(40.00±1.00)％、(29.67±2.08)％;效靶比1:8时Raji细胞(41.79±3.58)％比(33.79±1.15)％、(27.62±2.07)％,Raji-LUC细胞(36.20±0.53)％比(31.90±0.66)％、(23.13±1.06)％,均P<0.05〕.结论 CD19?CAR-T细胞能有效杀伤CD19阳性肿瘤细胞,血必净注射液可有效提高CD19?CAR-T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力.