摘要目的:基于网络药理学和动物实验验证加减芪苓通络方治疗特发性膜性肾病(IMN)的作用机制.方法:基于网络药理学研究分析加减芪苓通络方治疗IMN的可能作用靶点和通路.采用尾静脉注射羊抗大鼠Fx1A血清建立IMN大鼠模型,给予加减芪苓通络方(5.24 g/kg)和盐酸贝那普利(10 mg/kg)灌胃,干预 4 周.给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色及马松(Masson)染色观察大鼠肾组织病理学改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织磷酸化磷脂酰肌醇-3 激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇-3 激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白l轻链 3(LC3)、苄氯素 1(Beclin1)蛋白表达;免疫荧光检测大鼠肾组织免疫球蛋白G(IgG)、核孔糖蛋白(p62)表达水平.结果:通过网络药理学研究获得加减芪苓通络方活性成分60 个,核心靶点1 022 个,加减芪苓通络方与疾病共有基因靶点231 个.加减芪苓通络方治疗IMN的关键靶点有血管内皮生长因子A(VEGFA)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶蛋白1(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、原癌基因(JUN)等,可影响类固醇激素受体、磷脂酶C活性正向调节等多个生物学过程,及PI3K/AKT、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等多个信号通路.动物实验表明:加减芪苓通络方可减轻IMN大鼠肾组织病理损伤,减少IgG及p62 荧光表达,上调LC3 Ⅱ、Beclin 1 的蛋白表达水平,降低p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达(P<0.05).结论:加减芪苓通络方具有多成份、多靶点、多通路的作用特点,可通过调控PI3K/AKT/mTOR通路,提高IMN大鼠肾脏自噬水平,减轻肾损伤.