淫羊藿苷促骨髓间充质干细胞骨向分化的实验研究
The Effect of Icariin in Promoting Osteogenic Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells
摘要目的:探讨淫羊藿苷在促骨髓间充质干细胞骨向分化过程中对单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子2同系物1(SIRT1)/氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂-1α(PGC1α)通路的影响.方法:以第3代骨髓间充质干细胞细胞为研究对象,将其分为对照组(正常培养)、骨向诱导组(在2 mmol/L L-谷氨酰胺、100 nmol/L地塞米松、10 mmol/L β-甘油磷酸酯、50 μmol/L L-抗坏血酸-2-磷酸脂中进行骨向诱导)、淫羊藿苷低、中、高剂量组(在骨向诱导的基础上添加0.01,0.10,1.00 μmol/L的淫羊藿苷)、抑制剂组(在淫羊藿苷高剂量组的基础上添加10 μmol/L AMPK抑制剂Compound C).CCK-8法检测细胞增殖;茜素红染色检测细胞矿化能力;ELISA试剂盒检测细胞中碱性磷酸酶(ALP)的表达;Western Blot法检测细胞中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、骨保护素(OPN)和AMPK/SIRT1/PGC1α通路蛋白表达.结果:对照组无矿化结节形成;骨向诱导组有明显的矿化结节;淫羊藿苷低、中、高剂量组矿化结节直径变大,染色变深,数量增多;抑制剂组矿化结节颜色变浅,结节变少.骨向诱导组OD450值、ALP、BMP-2、OPG、p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC1α 表达高于对照组(P<0.05);淫羊藿苷低、中、高剂量组OD45.值、ALP、BMP-2、OPG、p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC1α 表达高于骨向诱导组(P<0.05);抑制剂组OD45.值、ALP、BMP-2、OPG、p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC1α表达低于淫羊藿苷高剂量组(P<0.05).结论:淫羊藿苷可以促进骨髓间充质干细胞的骨向分化,其机制可能是通过激活AMPK/SIRT1/PGC1α通路实现的.
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