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补中益气汤调节信号通路对椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡的影响

Effect of Buzhong Yiqi Decoction on Apoptosis of Nucleus Pulposus Cells in Rats with Intervertebral Disc Degeneration by Regulating Signal Pathway

摘要目的:探究补中益气汤对椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡和氧化应激的影响及其可能作用机制.方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、补中益气汤低剂量组、补中益气汤高剂量组、补中益气汤高剂量+抑制剂(Nrf2/ARE信号通路抑制剂-ML385)组;Pfirrmann评分评价椎间盘退变;苏木精-伊红(HE)染色观察椎间盘组织形态;TUNEL检测髓核细胞凋亡;ELISA法检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-18(IL-18)和IL-1β水平;检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性;Western Blot法检测PGC-1α、TFAM、Aggrecan、MMP13、Collagen Ⅱ、Bax、Bcl-2、Nrf2和ARE蛋白表达水平.结果:与假手术组相比,模型组大鼠髓核细胞皱缩聚集,纤维环排列杂乱,Pfirrmann评分、髓核细胞凋亡率、血清LDH、TNF-α、IL-18和IL-1β水平、髓核组织MDA含量、MMP13和Bax蛋白表达水平升高,髓核组织SOD和GSH-PX活性、PGC-1α、TFAM、Aggrecan、Collagen Ⅱ、Bcl-2、Nrf2和ARE蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,补中益气汤低、高剂量组大鼠髓核组织形态有明显改善,Pfirrmann评分、髓核细胞凋亡率、血清LDH、TNF-α、IL-18和IL-1β水平、髓核组织MDA含量、MMP13和Bax蛋白表达水平降低,髓核组织 SOD 和 GSH-PX 活性、PGC-1α、TFAM、Aggrecan、Collagen Ⅱ、Bcl-2、Nrf2 和 ARE蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);抑制剂可降低补中益气汤对椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡及氧化应激的减轻作用,差异有统计学意义(P<0.05).结论:补中益气汤可能通过激活Nrf2/ARE通路来降低椎间盘退变大鼠氧化应激和髓核细胞凋亡,改善椎间盘组织损伤.

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