基于内质网应激的丹参酮ⅡA磺酸钠调节主动脉瓣膜间质细胞钙化机制研究

Sodium Tanshinone ⅡA Sulfonate Attenuates Aortic Valve Calcification Via Regulating ER Stress Related Inflammatory Pathways

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摘要目的:研究丹参酮IIA磺酸钠对低密度脂蛋白 (ox LDL) 诱导的猪主动脉瓣膜间质细胞 (porcine valvular interstitial cells, VICs) 钙化模型内质网应激 (ERS) 因子作用的影响.方法:分离VICs免疫荧光法鉴定细胞, 应用ox LDL建立细胞模型, MTT法筛选最佳丹参酮IIA磺酸钠干预浓度, 茜素红染色测量钙化结节, 免疫印记法及实时荧光定量PCR法检测ERS通路中BIP、Chop、Runx2及Osteocalcin蛋白及基因表达, ELISA法检测细胞培养上清液中炎症因子表达, 应用MCP-1中和抗体观察MCP-1在成骨化中的作用.结果:在成功建立ox LDL诱导的VIC细胞模型基础上, 茜素红染色显示丹参酮IIA磺酸钠组钙结节形成较ox LDL模型组差异有统计学意义;丹参酮IIA磺酸钠可抑制BIP、Chop细胞内基因的表达, 抑制Runx2及Osteocalcin蛋白表达, 同时可抑制IL-6、IL-8及MCP-1炎症因子的表达, 其表达与模型组比较差异有统计学意义, 但MCP-1中和抗体对成骨化因素影响较小.结论:丹参酮IIA磺酸钠可抑制ox LDL诱导的VIC炎症反应及成骨化, 其具体机制可能与抑制ERS通路有关.