建立启膈方UPLC指纹图谱并验证启膈方对食管癌转移的影响

Establishment of UPLC Fingerprint of Qige Formula and Verification of Its Effect on Metastasis of Esophageal Cancer

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摘要目的:观察启膈方对食管癌细胞迁移及侵袭的抑制作用,并建立启膈方的超高效液相(ultra performance liquidchromatography,UPLC)指纹图谱.方法:制备启膈方冻干粉,将高分化食管癌细胞Eca109分成对照组和启膈方组,应用划痕实验检测经启膈方干预前后食管癌细胞迁移能力的改变,借助荧光显微镜观察启膈方干预前后细胞形态的变化,采用蛋白芯片观察启膈方干预后肿瘤相关生长因子的变化,采用ACQUITY CSH C18(2.1mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,梯度洗脱、流速0.4 mL/min、检测波长254 nm、柱温40℃,并建立启膈方冻干粉UPLC指纹图谱.结果:启膈方组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05),荧光显微镜观察显示经启膈方干预后细胞形态规则,蛋白芯片结果显示启膈方能够降低肿瘤相关生长因子的表达,10批启隔方冻干粉相似度均在0.9以上,共标定了17个共有峰,指认出7个色谱峰,分别为迷迭香酸、异槲皮苷、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸E、金丝桃苷、紫草酸.结论:启膈方能够降低肿瘤相关生长因子的蛋白表达,从而降低食管癌细胞迁移能力,建立的启膈方冻干粉UPLC指纹图谱可为启膈方的质量评价及药效物质基础研究提供依据和参考.