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基于"天癸"学说分析健脾补肾方改善衰老Leydig细胞及睾酮分泌的作用机制

Analysis of the Mechanism of Jianpi Bushen Formula in Improving Aging Leydig Cells and Testosterone Secretion Based on the"Reproduction-Stimulating Essence"Theory

摘要目的 观察健脾补肾方改善睾丸间质(Leydig)细胞衰老模型的作用机制.方法 利用D-半乳糖(D-gal)构建Leydig细胞衰老模型,并分为正常Leydig细胞(空白)组、衰老Leydig细胞(模型)组、空白血清组与含药血清组.ELISA法检测睾酮分泌水平;CCK-8法检测衰老细胞的增殖活性;β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老程度;RT-qPCR与Western blot法检测细胞衰老以及睾酮分泌相关基因、蛋白的表达.结果 与空白组比较,衰老模型组睾酮分泌水平及细胞增殖活性显著降低(P<0.01),β-半乳糖苷酶阳性率及p21、p53 基因表达明显增加(P<0.01).与衰老模型组比较,含药血清组睾酮分泌水平与细胞增殖活性明显升高(P<0.01),细胞衰老数量显著减少(P<0.05),衰老相关p21、p53 基因表达明显降低(P<0.01),睾酮合成相关的类固醇合成急性调节蛋白(StAR)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和类固醇生成因子 1(SF-1)的蛋白和mRNA表达均明显升高(P<0.05).结论 健脾补肾方能有效改善细胞衰老状态并增强其增殖活性,具体机制可能与增强睾酮生物合成相关酶活性,进而促进睾酮分泌功能的恢复有关.本研究可为应用"先后天之精"与"天癸"理论抗男性生殖及机体衰老提供思路.

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