甘露消毒汤调控SARS-CoV-2假病毒感染hACE2小鼠RAS轴失衡的机制研究
Mechanism Study of Ganlu Xiaodu Decoction in Regulating RAS Axis Imbalance in hACE2 Transgenic Mice Infected with SARS-CoV-2 Pseudovirus
摘要目的 观察甘露消毒汤对严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)假病毒感染hACE2转基因小鼠的肾素-血管紧张素系统(RAS)轴相关靶点水平的影响,探究其作用机制.方法 将60只K18-hACE2转基因小鼠随机分为正常组、模型组和甘露消毒汤低、中、高剂量组.除正常组小鼠外,其余4组小鼠运用SARS-CoV-2假病毒滴鼻进行造模,造模成功后灌胃甘露消毒汤干预,于干预后第7天进行取材.观察小鼠一般状态、测定体重变化及肺指数,评估肺组织病理形态改变,ELISA法检测肺组织中Ang(1-7)、AngⅡ、eNOS含量;免疫组织化学法测定ACE2及AT1R蛋白表达;qPCR法检测ACE2、ACE、MAS、AT1R mRNA表达情况;Western blotting法测定ACE2、ACE、MAS、AT1R蛋白含量.结果 与正常组相比,模型组小鼠一般状态较差,体重增长率明显下降,肺指数、肺病理评分及肺组织中AngⅡ含量以及AT1R mRNA和蛋白表达均升高,Ang(1-7)、eNOS含量以及ACE2、MASmRNA及蛋白表达均降低(P<0.05),ACE mRNA和蛋白表达均无明显变化(P>0.05).与模型组相比,甘露消毒汤治疗后小鼠状态改善,体重增长率升高,肺指数、肺病理评分、肺组织中AngⅡ含量以及AT 1R mRNA和蛋白的表达整体降低,Ang(1-7)、eNOS含量以及ACE2、MAS mRNA和蛋白的表达均升高(P<0.05),ACE mRNA和蛋白的表达无明显变化(P>0.05).总体来看,甘露消毒汤高剂量组效果最佳.结论 甘露消毒汤可能通过调控SARS-CoV-2假病毒感染hACE2转基因小鼠Ang(1-7)/MAS轴及AngⅡ/AT1R轴相关靶点表达,起到抗炎和改善内皮损伤的作用,进而调控RAS稳态.
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