摘要目的 以上结膜入路法构建视神经脊髓炎相关性视神经炎(NMO-ON)大鼠模型,从活体与病理、视神经及脊髓、脑等多维度评价该模型.方法 将SD雄性大鼠30只随机分为对照组(CG)、模型组(MG),各15只.2组大鼠上结膜入路暴露视神经后,在球后2 mm处分别将健康对照人群血清和AQP4免疫球蛋白G(AQP4-IgG)阳性NMO患者血清注射至蛛网膜下腔,常规饲养14 d.术后第3天免疫荧光法检测视神经人AQP4-IgG表达.术前1 d、术后第7、14天分别行闪光视觉诱发电位(F-VEP)及瞳孔对光反射检测;术后第14天取2组大鼠视网膜、视神经、脑及脊髓组织制片,苏木精-伊红(HE)染色、勒克斯坚牢蓝(LFB)髓鞘染色观察大鼠组织形态,透射电镜观察大鼠视神经超微结构.免疫荧光法检测视神经水通道蛋白4(AQP4)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝蛋白L(NFL)、簇分化抗原68(CD68)表达.结果 (1)AQP4-IgG:MG组大鼠视神经中AQP4-IgG强表达,AQP4 和GFAP在AQP4-IgG沉积区域丢失;CG组则为阴性表达.(2)F-VEP:第14天MG组N1-P1振幅低于CG组,差异有统计学意义(t=96.639,P=0.000);2组第14天N1、P1波值比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(3)瞳孔对光反射实验:第14天MG组大鼠曝光前后瞳孔收缩的百分比低于CG组,差异有统计学意义(t=81.022,P=0.000).(4)组织形态:MG组大鼠视神经肿胀,轴突数量减少,微管微丝大量溶解,伴有不规则空洞化,其间见大量炎症细胞浸润,髓鞘严重分层、结构不完整.视网膜神经节细胞层细胞水肿明显,数量减少,且大小不一,核仁不清晰.脊髓与脑组织形态未见明显异常.(5)NFL、CD68:MG组大鼠视神经NFL表达低于CG组,CD68表达高于CG组,差异均有统计学意义(tNFL=28.103、tCD68=385.335,均P=0.000).结论 通过在大鼠视神经蛛网膜下腔显微注射人类AQP4-IgG阳性血清可成功构建NMO-ON大鼠模型,该模型显示了NMO-ON的特征性病理变化,包括星形胶质细胞破坏、炎症浸润、轴突损伤及脱髓鞘等.