长波和中波紫外线对 HaCaT 细胞DNA 损伤拉曼光谱对比研究

Comparative study on Raman spectroscopy of DNA damage of HaCaT cell induced by ultraviolet A and ultraviolet B irradiation

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摘要目的：通过分析长波紫外线（ UVA）和中波紫外线（ UVB）对HaCaT细胞作用后DNA拉曼光谱，从分子水平探索两者对HaCaT细胞DNA损伤作用的差异。方法取对数生长期的HaCaT细胞随机分为对照组、UVA组和UVB组。对照组3个样品，不进行紫外辐照（相当于照射前）；后2组分别于接受UVA和UVB照射（累计照射剂量分别为8．26×10－2和2．97×10－2 J／cm2）后，培养至照后0．5、1．0、2．0、3．0、4．0和5．0 h时收获细胞提取DNA，每个时间点3个样品。采用激光共焦拉曼光谱倒置显微镜系统记录各组HaCaT细胞全基因组DNA的拉曼光谱，对特征谱线进行归属，观察照射前后拉曼光谱特征谱线相对强度（Ιn／Ι0）变化。结果鸟嘌呤氢键、磷酸基静电斥力、腺嘌呤碱基分子内能和腺嘌呤碱基堆积力特征频率分别是669、1094、1230和1344 cm－1。 UVB组鸟嘌呤氢键、磷酸基静电斥力、腺嘌呤碱基分子内能的特征频率Ιn／Ι0均小于UVA组（ P＜0．01）；上述3个指标在紫外辐射类型和照后时间的交互效应上均有统计学意义（P＜0．01），UVB的损伤作用峰值均出现在照后1．0 h。 UVB组腺嘌呤碱基堆积力特征频率Ιn／Ι0大于UVA组（ P＜0．01）；紫外辐射类型和观察时间的交互效应有统计学意义（ P＜0．01），UVB的损伤作用峰值出现在照后3．0 h。结论 UVB的损伤作用对HaCaT细胞DNA的鸟嘌呤氢键、磷酸基静电斥力、腺嘌呤碱基分子内能和腺嘌呤碱基堆积力的损伤作用比UVA大，UVB的损伤作用峰值出现在照后1．0～3．0 h。