摘要目的 观察灵仙新苷(C-AR)对体外培养的膝骨关节炎(KOA)软骨细胞凋亡及自噬的影响,探讨其改善KOA的作用机制.方法 从接受全膝关节置换术的KOA患者软骨组织提取软骨细胞,通过甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞.将细胞分为对照组、模型组和C-AR组,对照组不予干预,模型组和C-AR组采用白细胞介素(IL)-1β诱导24 h构建KOA模型,C-AR组造模前用30μmol/L C-AR预处理1 h.CCK8法检测细胞活力,ELISA检测细胞IL-6和IL-8含量,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量和细胞凋亡率,Western blot检测Bax、Caspase-3、Bcl-2、Beclin1、LC33B蛋白表达,qRT-PCR检测Bax、Caspase-3、Bcl-2 mRNA表达,免疫荧光检测LCB表达.结果 与对照组比较,模型组软骨细胞活力显著降低(P<0.01),IL-6和IL-8含显著增加(P<0.01),ROS含量和细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),Beclin1、LC3B蛋白表达及LC3BⅡ/LC3BⅠ比值显著降低(P<0.01);与模型组比较,C-AR组软骨细胞活力显著升高(P<0.05),IL-6和IL-8含量显著减少(P<0.05),ROS含量和细胞凋亡率显著降低(P<0.01),Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),Beclin1、LC3B蛋白表达及LC3BⅡ/LC3BⅠ比值显著升高(P<0.01).结论 C-AR可减轻体外培养的KOA软骨细胞炎症反应,降低细胞凋亡率,其机制可能与激活自噬有关.