基于UPLC-Q-TOF-MS结合网络药理学与实验验证探讨健脾消癌方治疗结直肠癌作用机制

Discussion on the Mechanism of Jianpi Xiaoai Prescription in the Treatment of Colorectal Cancer Based on UPLC-Q-TOF-MS Combined with Network Pharmacology and Experimental Verification

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摘要目的探讨健脾消癌方的活性成分及其治疗结直肠癌(CRC)的作用机制.方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术鉴定健脾消癌方化学成分;通过TCMSP、SwissTargetPrediction数据库筛选活性成分及靶蛋白,STRING数据库进行蛋白相互作用分析,GeneCards数据库筛选CRC相关靶点,DAVID数据库进行GO和KEGG通路富集分析;对主要活性成分与关键靶点进行分子对接验证;构建CRC裸鼠模型,采用Western blot检测健脾消癌方对裸鼠CRC相关通路关键靶点的影响.结果筛选得到健脾消癌方活性成分35个,潜在作用靶点617个,与CRC相关靶点的交集靶点325个.活性成分作用靶点富集分析表明,主要富集在PI3K-Akt信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制、癌症中的蛋白多糖、T细胞受体信号通路、VEGF信号通路等相关通路.得到健脾消癌方作用于CRC的13个关键活性成分和6个关键靶蛋白EGFR、SRC、CA2、CA12、CYP19A1、MAPK3.Western blot实验结果表明,健脾消癌方可显著降低大鼠CRC样本中SRC、EGFR蛋白表达水平.结论健脾消癌方中活性成分可能通过调控EGFR、SRC,多靶点、多途径发挥抗CRC细胞增殖、侵袭及转移的作用.