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活血补肾安神方调控AhR-JDP2-Nrf2轴改善H9c2细胞氧化损伤的机制研究

Study on the Mechanism of Huoxue Bushen Anshen Prescription in Improving Oxidative Damage of H9c2 Cells by Regulating AhR-JDP2-Nrf2 Axis

摘要目的 基于AhR-JDP2-Nrf2轴探讨活血补肾安神方改善H9c2细胞氧化损伤的作用机制.方法 将H9c2细胞分为正常组、模型组、中药组、曲美他嗪组、空质粒组、过表达组、中药+过表达组、曲美他嗪+过表达组,采用H2O2诱导氧化应激模拟心肌损伤,转染Jun二聚化蛋白2(JDP2)过表达基因,分别予活血补肾安神方和盐酸曲美他嗪干预.流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞上清液丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)含量,Western blot检测H9c2细胞芳香烃受体(AhR)、JDP2、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达,RT-qPCR检测AhR、JDP2、Nrf2、HO-1 mRNA表达.结果 与正常组比较,模型组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率升高(P<0.01),细胞上清液MDA、SOD、NADPH含量升高(P<0.05),细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,中药组和曲美他嗪组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率显著降低(P<0.01),细胞上清液MDA、SOD、NADPH含量降低(P<0.05),中药组H9c2细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05).与空质粒组比较,过表达组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率升高(P<0.01),细胞上清液MDA、NADPH含量升高(P<0.01),SOD含量降低(P<0.01),细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与过表达组比较,中药+过表达组和曲美他嗪+过表达组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞上清液MDA、NADPH含量降低(P<0.01),SOD含量升高(P<0.01),细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05).结论 活血补肾安神方可能通过调节JDP2表达调控AhR-JDP2-Nrf2轴,减轻H9c2细胞氧化损伤,抑制心肌细胞凋亡,发挥保护心肌细胞作用.

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DOI 10.19879/j.cnki.1005-5304.202404404
发布时间 2024-10-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(82230124)
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