隔物灸对原发性痛经模型大鼠子宫BDNF启动子区DNA甲基化的影响
Effects of Indirect Moxibustion on DNA Methylation of BDNF Promoter Region in the Uterus of Dysmenorrheal Rats
摘要目的 观察隔物灸对原发性痛经(PD)模型大鼠子宫组织DNA甲基转移酶(DNMT)和脑源性神经营养因子(BDNF)启动子区DNA甲基化的影响,探讨隔物灸对PD模型大鼠表观遗传调控的作用机制.方法 将32只雌性SD大鼠随机分成空白组、模型组、隔物灸组和西药组,每组8只.采用冰水浴、苯甲酸雌二醇复合缩宫素方法制备PD寒湿凝滞证大鼠模型,造模第1日起,隔物灸组予隔盐灸"神阙"、隔姜灸"关元",每穴20 min,西药组予布洛芬溶液灌胃,均每日1次,连续10 d,第11日腹腔注射缩宫素后观察大鼠扭体反应并计算扭体评分,Western blot和荧光定量PCR检测子宫组织BDNF、DNMT3A、DNMT3B蛋白及mRNA表达,免疫组化染色检测子宫组织DNMT3A、DNMT3B阳性表达,亚硫酸盐测序检测子宫组织BDNF启动子区DNA甲基化程度.结果 与空白组比较,模型组大鼠扭体潜伏期缩短,扭体评分升高(P<0.01);子宫组织BDNF、DNMT3A、DNMT3B蛋白及mRNA表达升高(P<0.01),DNMT3A、DNMT3B阳性表达升高(P<0.01),BDNF启动子区DNA甲基化率降低(P<0.01).与模型组比较,隔物灸组和西药组大鼠扭体潜伏期延长,扭体评分降低(P<0.05,P<0.01);子宫组织BDNF、DNMT3A、DNMT3B蛋白及mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),DNMT3A、DNMT3B阳性表达降低(P<0.01),BDNF启动子区DNA甲基化率升高(P<0.01).结论 隔物灸"神阙""关元"可能通过升高BDNF启动子区DNA甲基化水平抑制BDNF转录,使BDNF表达下调,达到缓解PD模型大鼠疼痛的目的.
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