换一批
换一批巴戟天离体再生及农杆菌介导的遗传转化
In Vitro Culture and the Agrobacterium -mediated Genetic Transformation of Morinda officinalis
摘要目的:在巴戟天离体再生的基础上,建立一套根癌农杆菌转化的有效方法,为巴戟天新品种选育、引入外源目的基因奠定基础.方法:以巴戟天带节茎为材料,农杆菌菌株为EHA101,含有质粒载体pGA482GG,质粒上插入了GUS、NPTⅡ基因.结果:MT基本培养基附加BA 1 mg*L-1,外植体出芽率最高(97.8%),BA浓度升高,出芽率下降.外植体在培养基上的接种方式,以竖放为好,出芽所需的时间短且出芽率高.根的诱导,以MT附加0.2～0.5 mg*L-1NAA效果较好,生根率可达80.0%以上.巴戟天带节茎进行遗传转化,卡那霉素作为选择试剂,浓度为50 mg*L-1.头孢霉素用作抑菌剂,浓度为300 mg*L-1.经感染的外植体,在选择培养基上筛选1.5个月后,抗性芽发生率为14.8%,GUS基因表达检测结果,抗性植株中,GUS反应呈阳性所占比例为22.2%. 结论:通过探讨巴戟天的离体培养及根癌农杆菌介导的遗传转化,获得了较高的离体再生频率,建立了有效的遗传转化系统.
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主题词
转化, 遗传(Transformation, Genetic)再生(Regeneration)培养基(Culture Media)目的(Goals)根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)
分类号
S567
栏目名称
研究论文
DOI
10.3321/j.issn:1001-5302.2002.10.005
发布时间
2004-01-08
基金项目
国家自然科学基金
广东省自然科学基金
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