枸杞糖肽对缺氧及KCl诱导的心肌细胞钙超载的影响
Effects of LbGp on the intracellular free calcium concentration of cardiomyocytes induced by hypoxia and KCl
摘要目的:研究枸杞糖肽(LbGp)对低氧心肌细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响,以及对KCl诱导的心肌细胞钙超载的影响.方法:采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立心肌缺氧模型,实验分3组:正常对照组;缺氧模型组:细胞缺氧6 h;枸杞糖肽预处理组:加入枸杞糖肽,再行缺氧6 h.MTT法检测细胞活力.以Fluo/AM荧光指示剂负载,通过激光扫描共聚焦显微系统和Flou-3/AM荧光指示剂标记技术,观察枸杞糖肽对缺氧心肌细胞游离钙含量的影响.加入终浓度60 mmol·L-1KCl溶液,动态观察KCl刺激后心肌细胞[Ca2+]i的动态变化及LbGp预处理后对KCl诱导的钙超载的影响.结果:心肌细胞缺氧时间延长,损伤随之加剧,缺氧枸杞糖肽组心肌细胞荧光密度均较模型组显著降低(P<0.01),50 μg·mL-1LbGp最为明显,[Ca2+]i明显减少.枸杞糖肽组加入KCl溶液后[Ca2+]i荧光强度曲线升高,但与模型组比较,幅度明显减小,25,50,100 μg·mL-1 LbGp且呈现量效关系.结论:低氧导致心肌细胞钙超载,而枸杞糖肽能减轻钙超载.亦能对抗KCl诱导的心肌细胞钙超载.机制之一是枸杞糖肽作用于L型钙通道.
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