当归4-香豆酸辅酶A连接酶基因克隆与组织表达分析
Cloning and tissue expression of 4-coumarate coenzyme A ligase gene in Angelica sinensis
摘要4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate coenzyme A ligase,4CL)为高等植物苯丙烷代谢途径关键酶之一,在当归阿魏酸的生物合成中起调控作用.研究利用同源克隆结合cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆当归4CL编码基因全长cDNA序列,并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析4CL基因在当归幼苗生长过程中根、茎、叶组织中的表达特征.结果表明,获得的4CL cDNA序列(在GenBank已注册,登录号为KT880508)全长l 815 bp,含有1个1 632 bp的完整开放阅读框(opening read-ing frame,ORF),编码544个氨基酸的多肽链.4CL基因在当归幼苗不同生长阶段的根、茎、叶组织中均有表达,随着苗龄增大,茎、叶中的相对表达量显著增加(P<0.05),而根中表达量变化不大,表明4CL基因在当归幼苗中的表达具有明显的时空性.该研究为进一步研究4CL基因的结构与功能,解析当归阿魏酸的合成代谢机制和时空调控的分子基础奠定了工作基础.
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