染料木素对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用及CaM-CaMKIV信号通路的影响

Protective effects of genistein on Aβ25-35-induced PC12 cell injury via regulating CaM-CaMKIV signaling pathway

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摘要染料木素是一种异黄酮类化合物,被称为植物雌激素,对心血管疾病、肿瘤、绝经后相关妇科疾病等都有较好的临床疗效,在阿尔茨海默病(AD)的防治上具有潜力.该实验通过观察染料木素对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用及CaM-CaMKIV信号通路的影响,探讨染料木素对AD的神经保护作用机制.体外培养PC12细胞,MTT法筛选染料木素安全浓度和Aβ25-35的造模浓度和最佳给药时间.预先给予不同浓度染料木素(25,50,100 μmol·L-)处理PC12细胞后,以Aβ25-35建立AD细胞模型.采用MTT法检测染料木素对AD细胞模型细胞存活率的影响,倒置显微镜观察细胞形态的改变,AO/EB荧光染色观察细胞的凋亡情况,观察染料木素对AD细胞模型的神经保护作用并确定染料木素最佳给药浓度,qRT-PCR和Western blot法检测细胞中CaM,CaMKK,CaMKIV,tau的mRNA和蛋白表达.结果显示,和空白组相比,AD模型组细胞存活率明显下降,细胞损伤增加,凋亡细胞增多,CaM,CaMKK,CaMKIV,tau的mRNA含量和蛋白表达明显升高,而染料木素可明显提高AD细胞模型的细胞存活率,减少AD细胞模型的细胞损伤和细胞凋亡,显著下调AD细胞模型中CaM,CaMKK,CaMKIV,tau的mRNA含量和蛋白表达.结果表明染料木素对Aβ25-35诱导的AD细胞模型具有明显的神经保护作用,其作用机制可能与下调CaM-CaMKIV信号通路及其下游tau蛋白的表达有关.

作者蔡标 ^[1] 叶树 ^[2] 王艳 ^[1] 华如鹏 ^[2] 汪婷婷 ^[1] 李静 ^[1] 江爱娟 ^[3] 申国明 ^[4] 学术成果认领

作者单位安徽中医药大学中西医结合学院,安徽合肥230038;安徽省中医药科学院中西医结合研究所,安徽合肥230038 ^[1] 安徽中医药大学中西医结合学院,安徽合肥,230038 ^[2] 安徽中医药大学研究生院,安徽合肥,230038 ^[3] 安徽省中医药科学院中西医结合研究所,安徽合肥230038;安徽中医药大学研究生院,安徽合肥230038 ^[4]

关键词染料木素阿尔茨海默病 PC12细胞 CaM-CaMKIV信号通路 tau蛋白 genistein Alzheimer's disease PC12 cell CaM-CaMKIV signaling pathway tau protein

主题词细胞(Cells)着色剂(Coloring Agents)木素(Lignin)蛋白(Egg White)创伤和损伤(Wounds and Injuries)

栏目名称

药理

发布时间 2018-06-06

基金项目

国家自然科学基金项目（81202941,81574040）；安徽省高校自然科学研究重点项目（KJ2016A406）；安徽省高校优秀中青年骨干人才国外访学研修重点项目（gxfxZD2016119）；安徽省高校优秀青年人才支持计划重点项目（gxyqZD2016138）