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绞股蓝皂苷酶促反应规律研究及其转化产物的鉴定

Enzymatic reaction pattern of saponins in Gynostemma pentaphyllum and identification of their transformed products

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摘要稀有皂苷活性普遍好于其原形皂苷,不同干燥方式绞股蓝中稀有皂苷/原形皂苷的组成比例及药效差异显著,可能与葡萄糖苷酶的酶促反应有关.为探究绞股蓝加工过程中葡萄糖苷酶的酶促转化反应及其规律,同时也为绿色生产稀有皂苷提供技术支撑.该实验从新鲜绞股蓝叶片中提取葡萄糖苷酶,构建模拟反应体系与原型绞股蓝皂苷提取物进行体外模拟反应,并采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱跟踪检测反应前后的底物、中间产物、终产物,进一步采用中药化学手段纯化并鉴定部分底物和产物,探讨其酶促反应规律.研究结果证实了绞股蓝皂苷-β-葡萄糖苷酶的酶促转化作用,指认了该转化过程中4组共15个皂苷类成分,包括PPD型中性皂苷和酸性皂苷(乙酰基皂苷、丙二酰基皂苷等).纯化鉴定了其中4个底物与产物,并明确了绞股蓝皂苷-β-葡萄糖苷酶具有一定的选择性,酶解反应规律如下:①仅水解中性皂苷,乙酰基和丙二酰基等酸性皂苷不易被水解;②水解位点均为皂苷C-3位的葡萄糖基,C-20位的葡萄糖基不易被水解.利用绞股蓝的酶促反应,可实现高效转化生成稀有皂苷,研究结果有助于扩大和提升绞股蓝的利用价值.

作者杨紫晴 ^[1] 李敏 ^[2] 徐书杨 ^[1] 杨丹 ^[2] 黄琴 ^[3] 金德珍 ^[3] 马云璞 ^[3] 金佩芬 ^[4] 朱晶晶 ^[2] 刘守金 ^[5] 王智民 ^[2] 学术成果认领

作者单位安徽中医药大学,安徽合肥 230012;中国中医科学院中药研究所,北京 100700 ^[1] 中国中医科学院中药研究所,北京 100700 ^[2] 平利县茶叶和绞股蓝发展中心,陕西安康 725500 ^[3] 嘉兴市食品药品与产品质量检验检测院,浙江嘉兴 314050 ^[4] 安徽中医药大学,安徽合肥 230012 ^[5]

关键词绞股蓝皂苷酶促转化分离鉴定 Gynostemma pentaphyllum saponins enzymatic conversion separation and identification

栏目名称

制剂与炮制

DOI 10.19540/j.cnki.cjcmm.20240605.301

发布时间 2024-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

中国中医科学院科技创新工程项目（CI2021A04408）中国中医科学院科技创新工程项目（CI2023E001TS03）北京市自然科学基金（7242248）国家自然科学基金（81573600）