摘要该研究探讨参麦注射液通过激活Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路诱发速发型超敏反应的机制.在体内实验中,将ICR小鼠随机分为阴性对照组,参麦注射液低(7.5 mL·kg-1)、中(15 mL·kg-1)、高(30 mL·kg-1)剂量组和阳性对照组,采用小鼠耳廓蓝染法检测药物对血管渗出的影响,并观察肺组织病理变化.在体外实验中,通过血管内皮细胞单层通透性测试和鬼笔环肽染色,评估参麦注射液对血管内皮屏障和细胞骨架的影响.借助Western blot方法检测参麦注射液给药后RhoA/ROCK信号通路关键蛋白磷酸化肌球蛋白调节轻链 2(p-MLC2)、肌球蛋白调节轻链 2(MLC2)、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶标亚基 1(p-MYPT1)、肌球蛋白磷酸酶靶标亚基 1(MYPT1)、三磷酸鸟苷结合型RhoA(GTP-RhoA)、RhoA在血管内皮细胞及小鼠耳、肺组织中表达的变化.为了验证RhoA/ROCK信号通路在参麦注射液速发型超敏反应中的作用,观察小鼠提前给予ROCK抑制剂法舒地尔后参麦注射液诱导血管通透性增高反应情况的变化.实验结果显示,参麦注射液可引起ICR小鼠出现剂量相关的血管通透性增高,30 mL·kg-1剂量组动物耳血管明显渗出且肺呈现轻微肺泡壁增厚;同时,参麦注射液造成给药浓度相关的血管内皮屏障功能降低,细胞骨架结构变化.分子机制研究发现,参麦注射液能显著上调血管内皮细胞及小鼠耳、肺组织GTP-RhoA/RhoA、p-MLC2/MLC2、p-MYPT1/MYPT1 水平;此外,ROCK抑制剂法舒地尔可显著减轻参麦注射液所诱发的血管通透性增高反应,提示RhoA/ROCK信号通路在参麦注射液所致超敏反应中起关键作用.结果表明,参麦注射液诱发速发型超敏反应的风险可能与给药剂量过高或给药速度过快有关,RhoA/ROCK信号通路在该反应中发挥重要作用.