膜联蛋白A7表达抑制对HepG-2细胞中galectin-3及PKC表达的影响
Expression of galectin-3 and PKC in annexin A7 knockdown HepG-2 Cells
摘要目的:探讨抑制膜联蛋白A7(ANXA7)表达对人肝癌 HepG-2细胞半乳糖凝集素3(galectin-3)的影响以及联合佛波酯(PMA)激活PKC后对 ANXA7表达的影响。方法将细胞分为 siRNA 干扰组、阴性对照组和空白对照组。采用RNA干扰技术将靶向 ANXA7的 siRNA和阴性对照 siRNA脂质体转染法分别转染肝癌 HepG-2细胞,空白对照组不予任何处理。转染48h后,采用 Western blot 和 RT-qPCR法进行抑制效果的鉴定。Western blot和 RT-qPCR法分别检测 ANXA7表达抑制的 HepG-2细胞中galectin-3的表达。转染48h后用100ng/ml PMA处理24h,Western blot法检测ANXA7及PKC的表达。结果靶向 ANXA7的 siRNA可显著抑制 ANXA7的表达;ANXA7表达受抑后的 HepG-2细胞中 galectin-3的表达下降,与阴性对照组和空白对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。PMA 处理24h 后,ANXA7及 PKC 表达变化不显著。结论 ANXA7表达抑制的 HepG-2细胞中galectin-3的表达显著下调,这可能是ANXA7表达受抑的细胞行为学发生改变的机制之一。
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