换一批小鼠睾丸特异表达蛋白GM1142抗体制备与应用
Antibody preparation and application of mouse testis specifically-expressed protein GM1142
摘要目的 制备睾丸特异性表达蛋白GM1142的多克隆抗体,研究其小鼠睾丸组织的表达与定位情况,为进一步探究其在精子发生中的功能奠定基础.方法 通过生物信息学分析选取小鼠GM1142 N端1-153个氨基酸为抗原肽,通过分子克隆技术构建重组原核表达载体pET42b-T7-GM1142N153-8×His,诱导表达后纯化并用以免疫新西兰大白兔和小鼠制备GM1142的多克隆抗体.蛋白免疫印迹和免疫荧光染色检测GM1142在小鼠各组织、不同发育时期的睾丸、以及睾丸中各细胞类型中的表达与定位特征.结果 GM1142 在睾丸中特异性高表达;免疫荧光染色结果显示GM1142 在小鼠精原细胞和早期精母细胞的胞质中呈现强荧光信号.结论 GM1142 在睾丸中特异性高表达并可能在精原细胞发育和精母细胞减数分裂中具有重要作用.
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