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Ki-67 MIB1克隆膜表达交叉反应的验证

Verification of cross reactivity of Ki-67 MIB1 clone membrane expression

摘要目的 测试Ki-67 MIB1克隆在甲状腺透明变梁状肿瘤(hyalinizing trabecular tumor,HTT)的免疫组织化学膜表达定位的最适染色条件,确认MIB1膜表达的客观方法学对照和可重复的染色标准.方法 纳入扁桃体、阑尾、肾脏、肝脏、肺、胰腺、皮肤、胎盘、前列腺、卵巢和羊膜各33例,对MIB1鼠抗人单克隆抗体行Envision两步法实验条件摸索.然后采用HTT和非HTT各16例以及17例硬化性肺细胞瘤(PSH)来观察各平台(Omnis、BenchMark Ultra、BondMAX)与手工检测对比MIB1的实际表达情况.结果 正常肺组织呈现弱的细胞膜表达,HTT为肿瘤细胞膜中等至强表达,而PSH为肿瘤细胞膜弱至中等表达.手工检测方式,高压热修复(121℃,2~2.5 min)或煮沸修复(100℃,20 min),MIB1效价浓度(1∶50~100)均能实现肺的细胞膜定位,与修复pH和所使用的二抗体系无明确关联.对比全自动平台发现,采用MIB1浓缩液1∶50稀释均无法实现正常肺的细胞膜表达.16例HTT MIB1膜染色,BenchMark Ultra和手工相比存在肿瘤细胞膜表达偏弱或无表达的明显差异,16例非HTT病例在各平台上均无细胞膜着色.17例PSH在3种全自动平台膜表达与手工方式相比,肿瘤细胞均存在膜表达不足或缺失的差异.结论 高压热修复或煮沸状态下,MIB1 1∶50~100,肺组织可以作为MIB1 HTT染色的理想外部对照.基于上述必备条件,可以实现近100%的HTT膜表达.

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中国组织化学与细胞化学杂志

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