换一批
换一批大鼠主动脉血管内皮细胞组织块天花板培养法提取及鉴定
Isolation and identification of rat aortic endothelial cells using the tissue explant ceiling culture method
摘要目的 运用组织块天花板培养法体外分离大鼠主动脉血管内皮细胞(aortic vascular endothelial cells,AECs),为进一步开展高血压动脉粥样硬化、肺动脉高压等血管性疾病研究提供重要的工具细胞.方法 取60 g SD大鼠1只,无菌分离出胸、腹主动脉,剔除血管外筋膜、脂肪组织后,将内膜外翻,予0.1%Ⅱ型胶原酶预消化15 min后,将其剪碎成米粒状大小,采用"组织块天花板法"进行原代培养.通过细胞形态学观察、免疫细胞化学染色法检测第Ⅷ因子相关抗原及血管形成实验鉴定所培养的目的细胞.结果 培养2 d后,少量短梭形细胞从血管组织块边缘爬出;4 d后"岛屿状"的细胞集落形成;6～8 d后集落融合成片,呈典型的单层、"鹅卵石样"、镶嵌式排列;第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色显示胞质淡染成棕红色,阳性细胞率达99%以上;血管形成实验为阳性.结论 "组织块天花板培养法"能够简单、高效地提取原代大鼠AECs.
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关键词
大鼠主动脉血管内皮细胞组织块天花板培养法第Ⅷ因子相关抗原血管形成实验Aortavascular endothelial cellstissue explant ceiling culture methodfactor Ⅷ related antigenangiogenesis experiment
分类号
R329.21
栏目名称
DOI
10.16705/j.cnki.1004-1850.2025.01.010
发布时间
2025-04-30
基金项目
国家自然科学基金（81072714）；
福建省科技厅自然科学基金资助课题（2017J01545）
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