换一批
换一批人源性抗-HBc单链噬菌体抗体库的构建
Construction of a phage display library of human single-chain Fv antibodies from peripheral blood lymphocytes of people with positive serum antibody against hepatitis B virus core protein
摘要目的构建人源性单链噬菌体抗体库,为筛选人源性抗-HBc单链抗体奠定基础.方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和噬菌体表面展示技术,直接从乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)阳性患者淋巴细胞中提取总RNA,逆转录成cDNA;合成全套人抗体可变区引物扩增抗体可变区基因,并将重、轻链可变区基因进行拼接装配成单链抗体(ScFv)基因,重组于噬菌粒载体pHEN1,转化抑制型大肠埃希菌E.coliTG1,以辅助噬菌体援救后,构建成人源性单链噬菌体库.结果成功地构建了人源性抗-HBc单链噬菌体库,库容量达106.结论利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术可以成功构建人源性单链抗体库,并达到建库标准,可进一步从中筛选人源性单链抗体.
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