换一批PET滤膜用于承载耳蜗基底膜培养的实验研究
Polyethylene Terephthalate Membrane Used as a Holder for Cochlear Organotypic Cultures
摘要目的：探讨一种适宜耳蜗组织贴壁培养的方法。方法 PET滤膜预先置入层粘连蛋白、鸟氨酸、胎牛血清按2：2：1比例混合均匀的液体中在4℃预孵过夜，选取出生四天的C57BL/6J小鼠作为研究对象。剥取基底膜以PET滤膜作为承载介质培养在加入含青霉素的培液中，48小时后收取样本，进行免疫荧光（一抗goat anti-otoancorin、mouse anti-beta tubu?linⅢ及对应二抗采用cy3 donkey anti goat，647 donkey anti mouse，染核试剂DAPI，phalloidin)观察不同部位细胞，扫描电镜及制备原位超薄切片透射电镜观察体外培养新生小鼠基底膜内外毛细胞、螺旋缘内细胞、螺旋神经元细胞显微结构的改变。结果耳蜗基底膜在PET膜上贴附生长良好。各种细胞的微小结构和超微结构保持正常状态。结论PET滤膜能作为一种新颖的承载基底膜培养的介质。
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关键词
聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)滤膜耳蜗器官培养毛细胞齿间细胞免疫荧光透射电镜扫描电镜Polyethylene terephthalate membraneCochlear organotypic culturesHair cellInterdental cellImmunocy-tochemistryScanning electron microscopyTransmission electron microscopy
分类号
R764.35（耳科学、耳疾病）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-2922.2015.01.013
发布时间
2015-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
江苏省自然科学基金资助（(项目号BK2010104)）
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