泛素E3连接酶Nedd4L介导Pendrin降解的作用机制研究
Nedd4L-mediated Ubiquitination of a Congenital Deafness-related Gene Pendrin Induces Pendrin Degradation
摘要目的 探讨泛素E3连接酶Nedd4L在Pendrin泛素化修饰中的作用及对Pendrin表达的影响.方法 培养293T细胞,Co-IP实验验证Nedd4L与Pendrin存在体内结合;构建Nedd4L真核细胞表达载体;转染293T细胞后Western Blot检测Pendrin的表达量以及泛素化程度.结果 Co-IP实验证实Nedd4L与Pendrin在293T细胞中存在体内结合;真核表达载体构建,能够表达完整Nedd4L蛋白;转染72h后,Pendrin在293T细胞中的表达量降低,泛素化修饰增加,在细胞膜表面表达降低.结论 Nedd4L能够结合Pendrin并通过促进其泛素化修饰以及降低细胞膜表面表达量.其机制可能是通过促进Pendrin泛素化修饰诱导Pendrin内化并进入泛素蛋白酶体途径降解.
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