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五种卵巢癌耐药细胞系的建立及其部分耐药相关基因的表达

Establishment of 5 resistant ovarian cancer cell strains and expression of resistance-related genes

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摘要目的建立5种卵巢癌耐药细胞系,并比较耐药与其非耐药卵巢癌细胞系之间部分耐药相关基因的表达差异.方法用卵巢癌细胞系SKOV3、A2780分别建立顺铂、卡铂、紫杉醇(商品名:泰素)耐药的细胞系SKOV3/DDP、SKOV3/C、A2780/DDP、A2780/C、A2780/toxol,验证其有关的生物学指标;并用RT-PCR技术检测耐药与其非耐药卵巢癌细胞系之间部分基因的表达差异.结果 (1) 所有耐药细胞系对相关药物的耐药指数(RI)较其非耐药细胞系均升高约3倍或以上,并对临床常用的一些化疗药物表现出不同程度的耐受性,RI达2～20倍;耐药细胞的生长速度较其非耐药细胞明显减慢(P<0.01);群体倍增时间明显延长1.4～2.4倍(P<0.01),但G1、G2、S期细胞比例无明显改变(P>0.05);耐药细胞中药物浓度较其非耐药细胞中下降约2.0～8.5倍(P<0.05).(2) 在检测的耐药相关基因中,耐药细胞较其非耐药细胞中表达下降的有p53、肺耐药蛋白(LRP-1)、多药耐药相关蛋白(MRP-1)基因,表达升高的有蛋白激酶C(PKC)、拓扑异构酶(topo)Ⅰ、topoⅡβ基因,无明显改变的有谷胱甘肽-S-转移酶(GST-pi)、topoⅡα基因,多药耐药蛋白(MDR-1)基因的表达改变不确定,包括升高和下降.结论在不同类型的耐药细胞中,耐药相关基因的表达改变存在很大的差异,说明耐药发生是一个多途径、多环节、很复杂的过程,使得临床处理更加困难.