胎膜早破孕妇胎盘与胎膜菌群丰度的高通量测序研究
High-throughput sequencing study on the abundance of placenta and fetal membrane flora in pregnant women with premature rupture of membranes
摘要目的探讨胎膜早破(PROM)孕妇及正常孕妇胎盘与胎膜菌群丰度的高通量测序结果及其差异。方法选择2019年1月至2020年2月于昆明医科大学第一附属医院产科分娩的15例孕妇为研究对象。根据其是否发生PROM 及其发生PROM 时孕龄,将其分别纳入未足月PROM(PPROM)组(n=5,PPROM 孕妇),足月PROM(TPROM)组(n=6,TPROM 孕妇)与对照组(n=4,未发生PROM 孕妇)。3组孕妇均于胎盘娩出后,立即采集胎儿面与母体面胎盘及胎膜组织样本各1份,提取胎盘、胎膜组织中菌群DNA,对其16S 核糖体RNA(rRNA)基因的高可变区(V3、V4区)进行高通量测序,并对3组孕妇胎盘、胎膜组织样本中菌群类别、构成进行分析。采用Metastats软件,对PPROM 组与对照组、TPROM 组与对照组、PPROM 组与TPROM 组胎盘与胎膜组织细菌菌属相对丰度进行非参数T 检验。3组孕妇分娩时年龄及体重等一般临床资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究遵循的程序符合2013 年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①3组孕妇分娩孕龄比较,差异有统计学意义(F=18.65,P<0.001)。②门水平,3组孕妇胎儿面与母体面胎盘及胎膜组织样本中相对丰度>0.1%的菌门,均为7种:厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、螺旋菌门(Spirochaetes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、蓝藻菌门(Cyanobacteria)、梭杆菌(Fusobacteria)。③属水平,3组孕妇胎儿面与母体面胎盘及胎膜组织样本中相对丰度>0.1%的菌属,均为6种:未分类菌属(uncultured bacterium)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、梭菌属(Clostridium)、链球菌属(Streptococcus)、链杆菌属(Catenibacterium)、密螺旋体属(Treponema)。④对3组孕妇胎儿面与母体面胎盘及胎膜组织样本属水平菌群差异性分析结果显示,PPROM 组、TPROM 组孕妇胎儿面与母体面胎盘及胎膜组织样本中梭菌属、链球菌属、未分类菌属、密螺旋体属相对丰度,均显著高于对照组,而PPROM 组、TPROM组链杆菌属相对丰度则显著低于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论正常孕妇及PPROM 与TPROM 孕妇胎盘、胎膜并非无菌,其胎盘、胎膜菌群分布具有多样性;与正常孕妇相比,PROM 孕妇胎盘、胎膜菌群多样性一致,但是部分菌群丰度有明显差异。
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