单纯疱疹病毒Ⅱ型胸苷激酶基因对人原发性肝细胞癌治疗作用的实验研究
An experimental study on treatment of human primary hepatocellular carcinoma with thymidine kinase gene of herpes simplex virus Ⅱ
摘要目的研究含单纯疱疹病毒Ⅱ型胸苷激酶基因(HSV-ⅡTK)对人原发性肝细胞癌SMMC-7721的治疗作用.方法用已构建的真核表达载体pcDNA3/TK,通过阳离子脂质体Lipofectin介导,体外转染人原发性肝细胞癌SMMC-7721.加入GCV,细胞培养.用RT-PCR,光镜,MTT,流式细胞仪等方法检测HSV-ⅡTK在SMMC-7721细胞中的表达及其对该细胞的杀伤作用.结果实验组细胞通过RT-PCR获得与目的基因(HSV-ⅡTK)大小一致(1000 bp)的特异性条带,而对照组细胞则无任何条带出现;MTT法检测显示,实验组的OD值明显低于对照组,且有显著意义(P<0.01);流式细胞仪检测显示,实验组可发现明显的凋亡峰,而对照组则无凋亡峰出现.结论通过阳离子脂质体Lipofectin介导,HSV-ⅡTK在SMMC-7721细胞中能够获得表达,其表达产物结合GCV可明显抑制人原发性肝细胞癌细胞的增殖.
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