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伴侣素CCT-eta在大鼠膝关节纤维化模型中的表达及作用

Expression and effect of chaperonin containing T-complex polypeptide subunit eta in rat model of knee arthrofibrosis

摘要目的:建立大鼠膝关节纤维化模型,探讨伴侣素CCT-eta在关节纤维化中的表达及调节作用。方法手术组取8只雄性SD大鼠,通过固定左膝建立关节纤维化模型。对照组为右侧膝关节,未行干预措施。8周后拆除固定测量膝关节活动度,取膝后关节囊以组织块法分离培养成纤维细胞。用qRT-PCR和Western Blot检测成纤维细胞中CCT-eta和α-SMA的mRNA和蛋白质的表达情况。通过成纤维细胞转染siRNA抑制CCT-eta的表达,再用Transwell技术检测成纤维细胞的迁移能力。手术组和对照组关节活动度比较、手术组和对照组、转染组和手术组的qRT-PCR和Transwell细胞迁移实验数据均采用独立样本t检验,P<0.05为有统计学差异。结果手术组固定8周后膝关节伸直角度为(85.7±4.1)°,较对照组(145.7±3.6)°明显降低(t=35.13,P<0.05)。手术组较对照组成纤维细胞CCT-eta 的mRNA 含量和α-SMA 的蛋白质的表达明显升高( t =113.40, P <0.05)。转染组较对照组α-SMA蛋白质的表达受到显著抑制。手术组成纤维细胞较对照组迁移能力明显增强,但转染组中细胞迁移能力受到抑制(t=270.90,P<0.05)。结论 CCT-eta在大鼠膝关节纤维化模型中表达升高,并增强关节囊中成纤维细胞的迁移力,从而促进关节纤维化。

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