磷脂酶C-γ1和γ2在PDGF促成纤维细胞克隆形成中的不同作用
Different roles of phospholipase C-γ1 and γ2 in clonogenicity of fibroblast cell induced by PDGF
摘要目的探讨磷脂酶Cγ1和γ2(PLC-γ1和γ2)在血小板源性生长因子(PDGF)诱导小鼠成纤维细胞克隆形成信号传导中的作用.方法将全长PLCγ2cDNA亚克隆进真核细胞表达载体,转染小鼠成纤维细胞株PLC-γ1-/-和PLC-γ1+/+,使PLC-γ2在成纤维细胞中表达,同时以未插入目的基因的空载体转染这两种细胞作为实验对照.用有限稀释法随机挑选几个单细胞克隆,经Western Blotting鉴定其PLC-γ2表达量,转染细胞及其相应对照被用来测量克隆形成能力.结果 PLC-γ2可在PDGF的作用下活化,对克隆形成有显著的正调控作用,而PLC-γ1基因对克隆形成无任何影响.并且γ2利于细胞低密度时的存活,因而,PLC-γ2可显著促进低密度细胞的克隆形成,γ1可能有相反作用.结论 PLC-γ1和γ2在PDGF诱导小鼠成纤维细胞克隆形成中的有不同作用.
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