抗转化生长因子β1核酶在胞外和肝星状细胞内对靶RNA的切割作用
Hammerhead ribozyme-mediated cleavage of transforming growth factor β1 RNA in a cell-free system and in hepatic steilate cells
摘要目的研究抗转化生长因子β1锤头状核酶的胞外切割作用以及在肝星状细胞内的活性.方法运用计算机设计针对转化生长因子β1的锤头状核酶,制备核酶、失活核酶和靶R N A胞外转录物,进行核酶的胞外切割反应;构建编码核酶、失活核酶的真核表达载体,并转染入活化型肝星状细胞株内,分析核酶和TGFβ1的表达.结果该核酶在胞外具有良好特异的切割活性,在转染的肝星状细胞内高效表达且有效下调TGFβ1的表达;而失活核酶在胞外不具有切割活性,在胞内对TGFβ1表达的抑制作用轻微. 结论此核酶在胞外具有特异切割活性,在肝星状细胞内抑制T G F β1的表达,有望为肝纤维化的治疗提供新的手段.
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