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溶瘤腺病毒SG611联合顺铂对肝癌细胞HepG2的协同杀伤作用及其机制

Synergistic cytotoxic effects and mechanism of oncolytic adenovirus SG611 combined with cisplatin on hepatocellular carcinoma HepG2 cells

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摘要目的：探讨溶瘤腺病毒SG611联合顺铂（DDP）对肝细胞癌（肝癌）细胞HepG2的协同杀伤作用及其作用机制。方法利用携带GFP的腺病毒载体SG611感染人肝癌细胞HepG2，流式细胞术检测SG611感染效率，CCK-8实验检测SG611联合DDP对肝癌细胞HepG2杀伤效应，结晶紫染色法观察细胞毒性作用；4'6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色法检测细胞凋亡率，Western blot检测E1A蛋白的表达。实验数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果 SG611-EGFP感染肝癌细胞HepG2荧光显微镜下观察，随着感染复数（MOI）的增加，GFP阳性细胞数目明显增加，流式细胞术检测SG611的感染效率分别为0.18%、6.36%、50.60%、73.20%、86.80%、90.50%，呈剂量依赖性。MOI=10的SG611与1.5μg/ml的DDP联合应用的细胞存活率为（33.2±1.2）%，明显低于单用SG611的（88.8±8.9）%（LSD-t=-7.83，P<0.05）；且联合应用对肝癌细胞HepG2的细胞毒性作用明显强于单用SG611。两者联合应用时肝癌细胞HepG2凋亡率为（23.9±1.5）%，明显高于单用SG611、DDP的（15.3±1.0）%、（12.4±1.1）%（ LSD-t=10.56，21.34；P<0.05）；且联合应用时肝癌细胞HepG2的E1A表达明显增强。结论溶瘤腺病毒SG611联合DDP对肝癌细胞HepG2具有协同杀伤作用。SG611增加DDP化疗敏感性及DDP增强SG611增殖能力可能为其协同杀伤的作用机制。

作者胡朝霞 ^[1] 台艳 ^[2] 刘炜 ^[2] 邱东波 ^[3] 张琪 ^[4] 学术成果认领

作者单位 510630广州，中山大学附属第三医院感染科; 510630广州，广东省肝脏疾病研究重点实验室 ^[1] 广东省肝脏疾病研究重点实验室,广州,510630 ^[2] 中山大学附属第三医院细胞与基因治疗转化医学研究中心,广州,510630 ^[3] 510630广州，广东省肝脏疾病研究重点实验室; 510630广州，中山大学附属第三医院细胞与基因治疗转化医学研究中心 ^[4]

关键词癌,肝细胞溶瘤腺病毒SG611 顺铂药物协同作用腺病毒E1A蛋白质类 Carcinoma,hepatocellular Oncolytic adenovirus SG611 Cisplatin Drug synergism Adenovirus E1A proteins

医学主题词细胞(Cells)肝肿瘤(Liver Neoplasms)肿瘤(Neoplasms)顺铂(Cisplatin)感染(Infection)

栏目名称

基础研究

DOI 10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2015.02.014

发布时间 2015-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家科技重大专项（2012ZX10002016-023）国家科技重大专项（2012ZX10002017-005）国家科技重大专项（2012ZX10002010-001-007）国家自然科学基金（81170452）国家自然科学基金（81370555）广东省自然科学基金（S20120011190）广东省科技计划（2012B061500005）