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RNA结合蛋白QKI-5表达对人头颈鳞癌细胞株的影响

Effects of RNA-binding protein quaking 5 on proliferation and cell cycle of head and neck cancer cell lines

摘要目的:研究QKI-5对人头颈鳞癌细胞株的生长抑制作用。方法采用Western blot和免疫组化方法检测人头颈鳞癌临床组织样本中的QKI-5的蛋白表达情况。常规培养舌鳞癌SCC15细胞、舌鳞癌SCC25细胞和头颈鳞癌PCI13细胞,以5×104/ml的密度种植细胞。采用Western blot和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测三种头颈鳞癌细胞株中的QKI-5的蛋白和mRNA表达情况。采用病毒介导QKI-5在SCC25细胞中过表达和在PCI13细胞中沉默QKI-5。采用MTT法和流式细胞法检测SCC25细胞中过表达QKI-5和在PCI13细胞中沉默QKI-5的细胞增殖和凋亡情况。采用Western blot方法检测SCC25细胞中过表达QKI-5和PCI13细胞中沉默QKI-5中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、CDK4、P27、PARP-cleaved蛋白的表达情况。结果 SCC15和SCC25细胞中QKI-5的蛋白和mRNA表达水平较低,而PCI13细胞中的QKI-5蛋白和mRNA表达水平较高。采用病毒介导的QKI-5过表达后,SCC25细胞中QKI-5的蛋白和mRNA水平显著增加。采用病毒介导的QKI-5沉默后,PCI13细胞中QKI-5的蛋白和mRNA水平显著减少。 SCC25细胞中过表达QKI-5后,细胞增殖减少(P<0.05),细胞多停留在G0/G1期,而凋亡增加,同时Cyclin D1和CDK4表达水平下调(P<0.05),P27和PAPR-clevead蛋白表达水平上调(P<0.05)。PCI13细胞中的QKI-5被沉默后,细胞增殖增加(P<0.05),细胞多进入S期,而凋亡减少,同时Cyclin D1和CDK4表达水平上调(P<0.05),P27和PARP-cleaved表达水平下调(P<0.05)。结论 QKI-5的表达可对人头颈鳞癌细胞增殖产生抑制作用。

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