CpG ODN增强树突状细胞对胃癌细胞增殖周期和凋亡影响的实验研究
Study on gastric cancer cell proliferation cycle and apoptosis with dendritic cells induced by CpG ODN1826
摘要目的 探讨CpG ODN1826 增强树突状细胞(DC)抗胃癌效应的作用.方法 分离正常人外周血DC,用GM-CSF 和IL-4 培养,于第5 天加入TNF-α并分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ组继续培养.第6 天各组均加入胃癌细胞冻融抗原50 μl,Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ组再分别加入CpG ODN1826 10 μg/ml,第10 天ELISA 检测IL-12 和IFN-γ的水平,MTT 法检测CTL 对MKN45、MKN28、SGC7901 和A549 细胞的体外杀伤效应.流式细胞术检测CpG ODN1826 增强DC 对胃癌细胞增殖周期、凋亡的影响.结果 体外培养第10 天,加入CpG ODN1826 后各组IL-12、IFN-γ的分泌量明显提高;CpG ODN1826 协助DC 对同种不同分化类型的胃癌细胞株MKN45、MKN28、SGC7901 均有强烈的杀伤效应(P <0.01),杀伤活性显著高于A549(P <0.01).体外应用CpG ODN1826 对肿瘤细胞周期比例:G0/G1 间期(MKN45 68.35%、MKN28 69.23%、SGC7901 69.80%),S 期(MKN45 39.45%、MKN28 39.75%、SGC7901 39.55%),G2/M 期(MKN45 6.50%、MKN28 6.30%、SGC7901 6.42%);与A549(G0/G1 间期57.68%,S 期25.13%,G2/M 期18.46%)比较,差异有统计学意义(P <0.01);同时,不同肿瘤细胞株的凋亡率分别为MKN45 75.20%、MKN23 73.87%、SGC7901 72.43%、A549 51.43%,表明CpG ODN1826 能显著增强DC 对胃癌细胞周期的抑制作用,促进胃癌细胞的早期凋亡(P <0.01).结论 CpG ODN1826 体外可显著增强DC 诱导出高效而特异的抗胃癌效应,显著抑制胃癌细胞分裂增殖、促进凋亡,可作为胃癌免疫治疗的一种有效方法.
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