运用免疫荧光法检测温热对于硼化合物细胞微分布影响
Analysis of the effect of mild temperature hyperthermia on Boron-10 compound distribution in vitro by immunofluorescence staining
摘要目的 硼中子俘获疗法(BNCT)的有效性主要取决于硼-10元素在肿瘤细胞内的聚集.目前的硼检测手段仅限于分析肿瘤组织中硼的平均浓度,不能准确地评价硼化合物(BPA)在组织中的详细分布.先前研究证实温热处理可以提高放疗疗效,本研究通过免疫荧光法检测温热是否对BPA细胞内的微分布有影响.方法 通过免疫荧光法分析硼化合物在肿瘤细胞中的分布以及温热对BPA分布的影响.在体外对人肺癌细胞株A549和人头颈部鳞状细胞癌细胞株SAS进行培养,并且加入BPA共培养1 h.另外,A549细胞经温热处理1 h后,利用抗BPA抗体通过免疫荧光法进行检测.免疫荧光强度通过图像分析软件进行分析.结果 检测发现BPA主要聚集于细胞核周围,BPA免疫荧光的强度随着培养基中BPA浓度的增加而增强.尽管在26 μg/ml浓度和13 μg/ml浓度时,细胞免疫荧光的平均强度相近,但直方图分析发现26 μg/ml时细胞主要向高荧光强度区域移动.经温热处理后,BPA在细胞中的分布没有明显增加.结论 本研究利用免疫荧光法对BPA在细胞内的分布进行了分析,以上结果暗示温热对肿瘤细胞硼摄取的影响可能主要需要通过改善肿瘤循环、增加肿瘤内BPA的输送来实现.
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